Wektory plazmidowe są podstawowym elementem wykorzystywanym do tworzenia systemów ekspresyjnych związanych z wytwarzaniem białek rekombinowanych o właściwościach terapeutycznych. Stabilne utrzymywanie się takiego wektora oraz jego charakterystyka w szczepie bakteryjnym umożliwia opracowywanie procesu fermentacji i produkcję białek na skalę przemysłową. Jednym z cech plazmidów jest jego liczba kopii (PCN), która ma wpływ  na poziom ekspresji białek.

Zespół IBA opracował metodę oznaczania liczby kopii plazmidu w szczepie gospodarza metodą Real-time PCR. Oferujemy opracowanie metody oznaczania PCN  dostosowanego do wymagań Państwa.

New cloning and expression vector derived from Escherichia coli plasmid pIGWZ12; a potential vector for a two-plasmid expression system.

Zaleski P, Wawrzyniak P, Sobolewska A, Mikiewicz D, Wojtowicz-Krawiec A, Chojnacka-Puchta L, Zielinski M, Plucienniczak G, Plucienniczak A Plasmid. 2012 May;67(3):264-71.

Opracowanie metody obejmuje: przygotowanie próbki, zaprojektowanie i optymalizacja starterów pozwalających na specyficzne przeprowadzenie reakcji, opracowanie krzywych wzorcowych, przeprowadzenie reakcji oraz analizę wyników zgodnie z wymogami danego zlecenia. Oznaczenie wykonujemy przy użyciu zwalidowanego aparatu MX5000P Agilent Technologist.

DNA

Kontakt

dr Agnieszka Sobolewska
tel. + 48 22 37 86 223
sobolewskaa@iba.waw.pl